In Mistresses volgen we het leven van 4 dames in zowel hun professionele als persoonlijke leven. Savi (Alyssa Milano) is een succesvolle advocate die klaar is voor een volgende stap in haar leven. Ze is bezig partner te worden op haar werk en thuis is ze met haar man (Brett Tucker) hard aan het werk om een gezin te stichten. Haar leven lijkt dan ook totaal niet op die van haar kleine zusje (Jes Macallan) die er compleet op los date en geen feestje mist. Voor beide vrouwen geldt dat April (Rochelle Aytes) hun beste vriendin is. Zij heeft net haar man verloren en is bezig haar eigen leven weer op te pakken na de tragische gebeurtenis. De groep wordt compleet gemaakt door Karen (Yunjin Kim) die als therapist een gecompliceerde relate heeft gehad met één van haar cliënten.